Төгу реакциясын орнату әдістері

Мазмұны:

Төгу реакциясын орнату әдістері
Төгу реакциясын орнату әдістері
Anonim

Бұл мақала жауын-шашын реакциясы құбылысына арналады. Мұнда біз осы құбылыстың тұжырымдау ерекшеліктерін, диффузия құбылысын, жалпы сипаттамаларын, адам өміріндегі рөлін және т.б. қарастырамыз.

Фономенге кіріспе

жауын-шашын реакциясының жалпы сипаттамасы
жауын-шашын реакциясының жалпы сипаттамасы

Преципитация – серологиялық типті құбылыс, оның барысында еритін антигендер антиденелермен әрекеттесіп, нәтижесінде преципитация – преципитат байқалады.

Преципитация реакциясының жалпы сипаттамасы – бір түрі. антиген мен антидененің үйлестірілген әсері. Бұл әрекеттесу түрлері белгілі антиденелер мен антигендерді қосу арқылы зерттелетін затта белгісіз антигендердің болуын анықтауға мүмкіндік береді. Тұздардың қатысуынсыз тұндыру процесі нашарлайды және ең жақсы оңтайлы 7,0-7,4 рН диапазонында болады.

Реакцияның құрамдастары

преципитация реакциясының компоненттері
преципитация реакциясының компоненттері

Төгу реакциясының құрамдастарының арасында үш негізгі элемент бар:

  1. Молекулалық табиғаты бар антиген. Бұл жақсы типті күйде, басқаша айтқанда, олеритін. Сондай-ақ, мұндай антигенді преципитоген деп атайды, ол лизат немесе ұлпа сығындысы және т.б. Преципитогеннің агглютиногеннен өзіне тән айырмашылығы бар, ол құрамындағы бөлшектердің мөлшерінде жатыр. Агглютиногенге тән жасуша өлшемі бар, ал преципитогендер молекуланың өлшеміне сәйкес келеді. Антиген ерітіндісі мөлдірлігімен сипатталады.
  2. Адам қан сарысуында, сондай-ақ зерттелген антиденелер бар иммунды диагностикалық сарысуда табылған антидене.
  3. Электролиттер - изотониялық натрий хлоридінің ерітінділері.

Преципитоген өндіру

Преципитация реакциясын орнату преципитогенсіз мүмкін емес, ол материалдарды ұнтақтау және олардан ақуыз антигендерін алу арқылы алынады. Экстракция қайнату немесе басқа әдістермен жүзеге асырылады.

Лизаттар, сондай-ақ тіндер мен мүшелер сығындылары, қан сарысуы, микробтық сорпа дақылдары негізіндегі фильтраттардың әртүрлі түрлері, сондай-ақ микроорганизмдердің тұз сығындысы және автолизат заттары таң қалдырады. преципитогендер мысалы.

Жауын-шашын жағдайында орнату

Енді преципитация реакциясын орнату әдісін қарастырайық.

Арнайы дайындалған пробиркаларда өтетін сақиналы-преципитация реакциясы жүргізіледі. Сарысуды ыдыс-аяқтың қуысына енгізеді, оны пипетка шүмегінің көмегімен қабырғаға құяды. Әрі қарай, тұндырғыштың тиісті мөлшері жоғарыдан мұқият қабатталады, содан кейін құбыр көлденеңінен тік күйге келтіріледі. Тұндыру реакциясын орнату және есепке алу - өте мұқият жұмыс. Нәтиже антиген мен антидене арасындағы шекарада ақ сақина пайда болғаннан кейін жазылады. Егер реакцияның әрекеттесетін элементтері бір-біріне сәйкес келсе, онда олар байланысады, бірақ бұл олардың өзара әрекеттесуінің ұзақ уақыт кезеңінен кейін білінеді

Тұндыру реакциясы Петри табақшасында немесе стақанда да жүргізіледі. агар гелі тасымалданатын слайд, оны кішкене қабатта жағыңыз. Ол гельде қатайғаннан кейін антигендер мен антиденелер орналастырылатын аздаған тесіктер кесіледі. Бұл әрекетті орындаудың екі жолы бар: радиалды иммунодиффузия әдісі және қос иммунодиффузия.

преципитация реакциясы қолданылмайды
преципитация реакциясы қолданылмайды

Жалпы ақпарат

Жауын-шашын жұмысының механикасы агглютинация құрылғысына ұқсас. Иммундық типті сарысудың әсерінен реакцияға түскен антиген оның дисперстік дәрежесін төмендетеді. Сарысудың да, антигеннің де мөлдірлігі маңызды шарт болып табылады.

Антигендерді антиденелердің үстіне қойсаңыз, реакцияның тіркелуін жақсартуға болады. Нәтижесінде сақина түріндегі тұнбалардың пайда болуын байқауға болады. Бұл құбылыс сақиналы жауын-шашын деп аталады және диаметрі 2,5-тен 3,5 мм-ге дейінгі арнайы түтіктерде жүзеге асырылады. Преципитация реакциясының жиі кездесетін мысалдарының бірі сібір жарасының диагнозы болып табылады.

Преципитация агардағы дифтерия дақылының токсигенділік деңгейін анықтауға мүмкіндік береді.

Қарастырылып отырған реакция кезіндеантигендік комплекстер мен антиденелердің преципитациясы жүреді. Преципитация – ауру немесе вакцинацияланған адам мен жануарлардың қан сарысуындағы антиденелердің мөлшерін анықтауға мүмкіндік беретін иммунологиялық құбылыс.

Титрлеу салдары

преципитация реакциясын құру әдістері
преципитация реакциясын құру әдістері

Жоғарыда аталған әдісті титрлеу арқылы алынған деректердің сандық түрде анықталмайтынын білу маңызды. Антиденелер санының сандық бағасын жасау және талдау үшін М. Гейдельбергер мен Э. Кабатпен эквиваленттік аймақты іздеу мен анықтауға негізделген арнайы реакция әдістемесі әзірленді. Антигендердің жас санын антисарысудың тұрақты көлемімен араластыру бастапқы түзілген тұнбаның ұлғаюына әкеледі, содан кейін антигендік кешендерді еріту қабілетінің артуына байланысты қайтадан азаяды. Әрбір түтіктегі супернатанттардағы антиденелердің мөлшерін анықтау арқылы антиденелері бар ыдыстардың белгілі бір саны сұйықтықтың жоқ болатынын таба аласыз. Мұнда басқа пробиркалармен салыстырғанда ең үлкен тұнба түзіледі. Осының және белоктардың жалпы мәнінен антигендік ақуыз тұнбасын алудың арқасында зерттелетін спецификалық сарысу көлеміндегі антиденелердің нақты мәнін алуға болады. Әрі қарай, тұнбаның ақуыз молекулаларының мөлшері азот мөлшерімен немесе колориметриялық әдістермен анықталады.

Мәндерді бағалау

тұндыру реакциясын орнату және есепке алу
тұндыру реакциясын орнату және есепке алу

Диагностикалық әдістемеде преципитация мәндерін бағалау иммундық сарысуда преципитин қасиетіне ие емес антидененің болу мүмкіндігін ескеруі керек, осыдан тұнбаның өзі болмауы мүмкін деген қорытынды шығады. антигендермен әрекеттескенде түзіледі. Мұндай молекулалардың тізіміне толық емес антиденелер және гамма-А глобулиндер тобының кейбір түрлері кіреді.

Зертханалық жағдайларда тұндыру реакциясы әр түрлі модификацияларда қолданылуын табады. Мысалы, термопреципитация реакциясы термиялық денатурацияға ұшырамайтын ботулизм, күйдіргі және т.б. бактериялық антигендерін анықтау үшін қолданылады. Реакцияның бұл түрі сақиналы тұнбаға қарағанда қайнаған күйде қарастырылатын материалдың фильтраттарын пайдаланады.

Күрделі қоспадағы тұндыру реакциясын талдау қоспаның жеке элементтерінің қасиеттерін сипаттауға мүмкіндік бермейді. Мұндай жағдайларда адам агарда тұндыру әдісіне жүгінеді, сонымен қатар иммуноэлектроферезді қолданады.

Диффузды жауын-шашын

жауын-шашын реакциялары
жауын-шашын реакциялары

Зерттеудің бұл саласында диффузды жауын-шашын реакциясы (RPD) ұғымы бар. Ол антиденелер мен еритін антигендердің гельінде диффузиялық қабілетіне негізделген. Диффузия – белгілі бір зат молекуласының басқа заттың молекулаларына ену қабілеті, ол жылулық қозғалыс нәтижесінде пайда болады.

Гель – сұйық фаза қатты фазада біркелкі таралатын дисперсті типті жүйе. Көбінесе мұндай реакция үшін агар гелі қолданылады.

Параметрлерді бергеннен кейін,молекулалар бір-біріне қатысты диффузиялай алатын жағдайларда, олардың кездесуі антиген + антидене кешенінің түзілуімен бірге жүреді. Мұндай ісік гельдің өзінде бола отырып, диффузияға қабілетті және ол жай көзбен анықтауға болатын жолақ түрінде тұнбаға түседі. Егер антиген мен антидене гомолог болса, жолақ түзілмейді.

Агар қабатында диффузия болатын жағдайды жасау компоненттерді құюды қамтиды, бірақ ұңғымалардың жалпы саны және олардың салыстырмалы орналасуы анықталады талап етілетін тапсырма түрін анықтайды. RPD адамға белгілі антидене сарысуын пайдаланып тестілеу арқылы белгісіз оқшауланған вирустарды анықтау және анықтау мүмкіндігін береді.

Қолданба

диффузды преципитация реакциясы
диффузды преципитация реакциясы

Преципитация ауруларды диагностикалауда ғана емес, сот-медициналық сараптамада да кеңінен қолданылады. Қылмыстық қарудан табылған қанның түрін, органның немесе тіннің бөлігін преципитация реакциясын қолданбайтын анықтауға болатын талдауды елестету қиын. Бұл процесте әртүрлі жануарлар мен құстарды иммундау арқылы алынатын тұндырғыш сарысулар қолданылады. Қан сарысуындағы титр деңгейінің 1:10000 кем болмауы маңызды, сонымен қатар ол жеткілікті ерекшелікке ие болуы керек. Анықталған қан немесе оның қыртысынан физикалық сығынды жасалады. одан әрі әсер ететін шешімтұндырғыш сарысу. Осы реакцияға сәйкес адамның да, жануарлардың да ұлпалары мен мүшелерінің белоктарының түрлерін белгілеуге болады. Бұлтты сығындыларды алу адамды агардағы жауын-шашынға жүгінуге мәжбүр етеді.

Қорытынды

Оқылған ақпаратты талдай отырып, преципитация реакциялары адам үшін өте маңызды деп қорытынды жасауға болады, өйткені олар антиденелерді пайдалана отырып, әртүрлі антигендерді диагностикалауға мүмкіндік береді, бұл құбылыс сот-медициналық сараптамада да кеңінен қолданылады және оның түрін анықтауға мүмкіндік береді. белгілі бір субъектіге қатысты қан, тін немесе мүше. Тұндырудың бірнеше түрлері мен әдістері бар, олар шешілетін мәселенің туындайтын қажеттіліктеріне сәйкес қолданылады.

Ұсынылған: