Микроскопиялық бақылаудың батыру әдісі құрылғының линзасы мен зерттелетін объектінің арасына арнайы сұйықтықты енгізуді қамтиды. Ол жарықтылықты арттырады және кескінді үлкейту ауқымын кеңейтеді. Осылайша, объектіні айтарлықтай үлкейтуге және оның ең кішкентай элементтерін жабдықты өзгертпей-ақ қарауға болады. Осыған сәйкес сұйықтық батыру деп аталады. Ол әртүрлі композициялар ретінде қызмет ете алады. Ең танымал - батыру майы. Оның мүмкіндіктерін толығырақ қарастырыңыз.
Жалпы ақпарат
Микроскопияға арналған алғашқы батыру майы балқарағай болды. Дегенмен, оның бір маңызды кемшілігі болды. Уақыт өте келе оның қасиеттері өзгерді және ол қажетті нәтижелерді алуға мүмкіндік бермеді. Ашық ауада сұйықтық біртіндеп конденсациялана бастады (қатайғанға дейін). Сәйкесінше сыну көрсеткіші де өзгерді. 20 ғасырда синтетикалық иммерсиялық май шығарыла бастады. Бұл сұйықтықта жоғарыда аталған жетіспеушілік болған жоқ.
Батыру майының стандарттары
Кілтсұйықтық параметрлері ГОСТ 13739-78 белгіленген. Стандартқа сәйкес, батыру майының құрамында:
- сыну көрсеткіші nd=1,515±0,001;
- қабат қалыңдығы 1 мм - 95%, 400-ден 480 нм дейін - 92% 500-ден 700 нм-ге дейінгі спектрлік диапазондағы өткізгіштік;
Батыру майды қолдануға болатын оңтайлы температура 20 градус. Халықаралық стандарттар да бар. ISO 8036/1 стандартына сәйкес сыну көрсеткіші 1,518 + 0,0005, ал 500-ден 760 нм-ге дейінгі спектрлік диапазон үшін 10 мм қабаттағы өткізгіштік 95%, ал 400 нм кезінде 60%.
Көрсетілген параметрлер флуоресцентті емес батыру майына сәйкес келеді. ISO 8036-1/2 стандарты люминесценция үшін сұйықтықтың сипаттамаларын анықтайды. 10 мм қабаттағы 500-ден 700 нм-ге дейінгі спектрлік диапазондағы өткізгіштік 95%, 365-тен 400 нм-ге дейін - 60%.
Параметрлік сәйкессіздіктердің қиындықтары
Жоғарыда аталған стандарттардағы анықталатын айырмашылық сәйкес емес сұйықтықты пайдаланған кезде белгілі бір линзаның өнімділігінің нашарлауына әкелуі мүмкін. Нәтиже:
- Контраст сфералық аберрацияға байланысты төмендеді.
- Зерттеу нысанындағы өріс түсті.
- Зерттелетін объектінің жазықтығында және оның кескінін қалыптастыру аймағындағы жарықтандыру біркелкі болмайды.
- Сурет бұлыңғыр болады.
Нюанстар
Оптикалық микроскоптар рұқсат етудің жоғарғы шегіне ие100 еседен сәл артық. Бұл үлкейту деңгейінде зерттелетін объектінің жарықтандыруы жоғары сапалы болуы керек. Әйтпесе, алынған кескін соншалықты қараңғы болады, бұл нысанды көру мүмкін болмайды. Өйткені, жарықтың сынуы мен шашырауы жабын әйнегі мен объектив арасында болады. Иммерсиялық май оның көбірек түсуіне ықпал етеді. Нәтижесінде кескін айқынырақ болады.
Жарықтың сыну ерекшеліктері
Таза суретті қалай алуға болады? Әртүрлі орталарда жарықтың сынуы әртүрлі жолмен жүреді. Мысалы, ауа мен шыныдағы сәулелердің сыну бұрыштары әртүрлі. Бірінші жағдайда көрсеткіш 1,0, екіншісінде - 1,5. Бұл басты мәселе.
Мұнайды қолдану зерттелетін объект арқылы өтетін сәулелердің сыну көрсеткішін азайтуға мүмкіндік береді. Өйткені, сұйықтық шыны сияқты бірдей параметрге ие. Нәтижесінде сырғытпа мен линза арасында біртекті орта түзіліп, зат арқылы өтетін жарықтың көп бөлігі аспапқа түседі. Нәтижесінде анық кескін пайда болады.
Техникалық ұпайлар
Әдетте, батыру линзаларының бөшкелеріне Маймен оюланған. Элементтің өзі 1,0 немесе одан жоғары апертура қажет болғанда пайдаланылады. Мұндай «батыру» линзалары сұйықтыққа тікелей батыру үшін қолданылады. Осыған байланысты олар толығымен мөрленген. Бұл линзаларды майдың зақымдануынан жоғары қорғанысты қамтамасыз етеді.
Жіктеу
Майлар тәжірибеде қолданыладыекі тұтқырлық: жоғары (В түрі) және төмен (А). Жиі қаптамада сыну көрсеткіші туралы ақпаратты табуға болады. Мысалы, олар иммерсиялық май (100 мл) шығарады, оның сыну көрсеткіші 1,515. Тұтқырлығы төмен сұйықтықтар ауа кеңістігіне, ал жоғары тұтқырлығы - конденсаторлармен бірге қолданылады.
Қолдану шарттары
Зерттелетін нысанның анық бейнесін алу үшін қарапайым ұсыныстарды орындау қажет:
- Зерттелетін нысанды өрістің ортасындағы жүгірткіден кішкене өсіммен табыңыз. Ол үшін төмен үлкейтетін объектив пайдаланылады.
- Мұнараны бұрыңыз.
- Линзаны 100x жұмыс күйіне енгізіңіз.
- Бір тамшы майды сырғымалы шыныға, екіншісін линзаға салыңыз.
- Нысан анық көрінгенше жақсы фокуспен жұмыс қашықтығын реттеңіз.
Жұмыс кезінде абай болу керек. Қабық пен объект арасындағы ауаның өтуіне жол бермеу маңызды.
Батыру майы "Minimed"
Сұйықтық люминесценттілерден басқа кез келген типтегі құрылғылардың ахроматикалық және апохроматикалық линзаларымен жұмыс істегенде қолданылады. Бұл батыру майды қолданған мамандардың айтуынша, оның бірнеше пайдалы қасиеттері бар. Сұйықтық жылтырды, жарық жоғалуын және оптикалық аберрацияларды азайта отырып, нысанның көрінуін айтарлықтай жақсартады. Майды пайдалану жабдық мүмкіндіктерінің ауқымын айтарлықтай кеңейтеді.
Тазалаужабдық
Батыру майымен жұмыс істегеннен кейін құрылғыны ретке келтіру керек. Тазалау линза құрғамай тұрып жасалуы керек. Май қалдықтарын кетіру үшін таза линза қағазы қолданылады. Барлық шыны беттерді тазалау үшін прокат парақ қолданылады. Объектив қағазын линза ерітіндісімен ылғалдандыру керек және қалған майды кетіру керек.
Тарихи дерек
Батыру механизмін алғаш түсіндірген ғалым Роберт Гук болды. 1678 жылы оның «Микроскопия» кітабы жарық көрді, онда барлық түсініктемелер берілген. 1812 жылы иммерсион линзаның аберрациясын түзету құралы ретінде ұсынылды. Идеяның авторы Дэвид Бастер болды. Шамамен 1840 жылы алғашқы иммерсиялық линзалар жасалды. Олардың жасаушысы Д. Б. Amici. Бастапқыда зерттеушілер анис майын батыру сұйықтығы ретінде пайдаланды. Сыну көрсеткіші әйнектің сыну көрсеткішіне жақын болды.
