Бактериялық инфекциялардың әртүрлілігі қоздырғышты нақты анықтауды және оның түрлерін анықтауды талап етеді. Микроорганизмнің түрін анықтау үшін микробиологтарға оның тинкториалды қасиеттері – микробтың әртүрлі бояғыштармен бояуға бейімділігі көмектеседі. Бұл әдіс қоздырғыштың морфологиясын зерттеуге мүмкіндік береді. Бактериялардың тинкториялық қасиеттері микробиология саласындағы практикалық және теориялық зерттеулер үшін үлкен маңызға ие.
Микробтық зерттеу
Бактериологияда микроорганизмдерді бояудың көптеген әдістері бар. Олардың барлығы бактериялардың тинкториалды қасиеттеріне негізделген. Бояу олардың пішінін, құрылымын, өлшемін, салыстырмалы орналасуын анықтауға мүмкіндік береді. Бұл жалпы биологияның және салыстырмалы микробиологияның микроорганизмдердің түрлерін жүйелеу мәселелерін шешуге мүмкіндік береді.
Оларды неге бояу керек
Бактериялар іс жүзіндемөлдір организмдер және бояуды қолданбай, олар әдеттегі микроскопия үшін нашар көрінеді. Объектілерді зерттеу үшін микроскопияның арнайы түрлерін (фазалық контраст, күңгірт өріс) пайдалануға болады, бірақ ең оңай жолы - бояу, содан кейін бактериялар кәдімгі жарық микроскопында көрінеді.
Үлгіні дайындау
Қолданылған бояу техникасына қарамастан, зерттелетін нысанды дайындаудың бірыңғай ережелері бар. Келесі кезеңдер міндетті:
- Стерильді құралдар шыны сырғытпаға жағынды жасайды.
- Үлгі кептірілуде. Бұл бөлме температурасында немесе кептіру шкафтарын пайдалану арқылы жасалады.
- Фиксация кезеңінен кейін – микроорганизмдер стақанға арнайы қосылыстармен бекітіледі.
- Дұрыс бояу - үлгі белгіленген уақыт бойы бояумен жабылады, содан кейін ол жуылады.
- Соңғы кептіру - үлгі қайтадан кептіріледі.
Ең таралған бояғыштар
Ең жиі қолданылатын бояғыштар әртүрлі қышқыл мәндері (рН) бар анилинге негізделген. Бояғыштардың көпшілігі спиртте сұйылтылған ұнтақтар болып табылады.
Бояғыштары катиондары болатын бояғыштар негізгі деп аталады (рН 7-ден жоғары). Оларды микроорганизмдерді қызыл (қызыл, сафранин), күлгін (метил күлгін, тионин), көк (метилен көк), жасыл (малахит жасыл), қоңыр (хризоидин) және қара (индулин) түстермен бояу үшін пайдалануға болады.
Бояғыштары аниондар болатын бояғыштар қышқыл деп аталады (рН 7-ден төмен). Олар үлгіні қызыл (эозин), сары (пикрин) немесе қара (нигрозин) бояйды.
Бейтарап бояғыштар тобы бар (мысалы, родамин В), онда катиондар да, аниондар да бояғыш ретінде әрекет етеді.
Өлі немесе тірі мәдениет
Бояу әдістері сынақ үлгісінің өмір сүру формасына сәйкес екі топқа бөлінеді.
- Өмірлік (өмір бойы) бояу. Микроорганизмдердің қасиеттерін зерттеудің бұл әдісі микробтардың өмірлік процестерін бақылауға мүмкіндік беретін тірі ұлпаларды зерттеуде қолданылады. Бұл бояу үшін уыттылығы төмен және ену қабілеті жоғары бояғыштар пайдаланылады.
- Поствитальді бояу. Бұл өлі немесе өлген микроорганизмдердің бояуы. Бактериялардың тинкториалды қасиеттерінің арқасында микробиологтар олардың құрылымын анықтайды. Дәл осы бояу ең көп қолданылады.
Грам-оң және грам-теріс
Түрлі дәрі-дәрмектерге арналған нұсқаулықта табуға болатын бактериялардың осы сипаттамалары. Бактериялардың тинкториалды қасиеттерін зерттеудің бұл әдісі гентиан күлгін бояуды және йодты бекітуді қолдануға негізделген. Бұл әдісті 1884 жылы ұсынған дат дәрігері Ганс Кристиан Грам жасады. Осы бояу нәтижесінде бактериялар екі топқа бөлінеді:
- Грам (+) - көк түске айналады(стафилококктар және стрептококктар).
- Грам (-) - қызғылттан қызылға дейін дақ (энтеробактериялар, сальмонеллалар, E. coli).
Әртүрлі бояу нәтижелері бактерия қабырғаларының әртүрлі тинкториалды қасиеттеріне байланысты. Грам әдісі әлі де кейбір жұқпалы ауруларды диагностикалаудағы негізгі әдіс болып табылады.
Басқа бояу әдістері
Бактериологияда кеңінен қолданылатын тағы бірнеше әдістерге сипаттама берейік.
- Зиел-Нельсон әдісі – бактериялардың қышқылға төзімділігін анықтайды. Ол туберкулездің және микобактериоздың қоздырғыштарын анықтайды.
- Романовский-Гиемса әдісі - ацидофильді (сірке қышқылы және сүт қышқылы) бактерияларды қызыл, ал базофилді (спирохеттер мен қарапайымдылар) көк түске бояйды.
- Морозов техникасы - бактерияларды қоңыр түске бояйды және олардың жіліктерін көрінетін етеді.
Спораларды көруге болады
Циелдің фуцинмен бояуы бактериялық спораларды көруге мүмкіндік береді. Бояудан кейін қызғылт түске ие, олар көк бактериялардың фонында анық көрінеді. Бұл әдіс сонымен қатар бактериологияның құралы болып табылады және үлкен практикалық маңызы бар.
