Қазіргі медицинада патогенді, иммундық жауапты ынталандыратын генетикалық жат заттарды, нуклеин қышқылдарын, сондай-ақ аллергиялық және иммундық өзгерістерді анықтау негізінде адамдағы аурулардың этиологиясын анықтауға мүмкіндік беретін арнайы диагностикалық әдістер бар. оның әрекеттеріне байланысты пайда болады. Бүгінгі таңда РИА иммунология мен вирусологияда кеңінен қолданылады, яғни радиоиммундық талдау, қою мақсаттары, құрамдас бөліктері, барысы, есепке алуы біз осы мақалада қарастырамыз. Бұл талдау антигендерді антиденелермен әрекеттесу нәтижесінде анықтауға қабілетті.
Анықтама
RIA – сұйықтықтардағы биологиялық белсенді заттарды диагностикалау әдісі, ол арнайы байланыстыру жүйелері бар радионуклидті таңбаланған аналогты заттарды пайдалану кезінде антигендердің антиденелермен реакциясына негізделген. Олардың өзара әрекеттесуінен кейіниммундық кешен түзіледі, ол бөлініп, оның радиоактивтілігі зерттеледі. Радиоиммунды талдау стандартты реагент жинақтары арқылы жүзеге асырылатыны белгілі.
Әр реагент бір нақты заттың концентрациясын анықтауға қабілетті. Адамнан алынған биологиялық сұйықтықты реагентпен араластырады, инкубациялық кезеңнен кейін бос және байланысқан радиоактивті заттарды ажыратады, содан кейін радиометрия жүргізіп, нәтижелерін есептейді. Заттарды таңбалау үшін йодтың изотопы қолданылады. Ол белгілі бір мөлшерде белгіленіп, қосылады.
Қолданба
Радиоиммундық талдау медицинада және микробиологияда кеңінен қолданылады. Ол жүрек және қан тамырлары ауруларын, эндокриндік және басқа дене жүйелерінің ауруларын диагностикалау үшін қолданылады. Сондай-ақ РИА жиі бедеуліктің себебін, ұрықтың даму патологиясын анықтау үшін қолданылады. Онкологияда бұл талдау емдеудің тиімділігін бақылау мүмкіндігіне ие болу үшін ісіктердің маркерлерін анықтау мақсатында жүргізіледі. Иммунологияда РИА қандағы иммуноглобулиндер, ферменттер, белоктар және т.б. болуын зерттеу үшін қолданылады. Бүгінгі күні бұл талдау бір граммның миллионнан біріне дейін әртүрлі гормондардың концентрациясын анықтауға мүмкіндік береді. Осылайша, радиоиммундық қан анализі кардиологияда, онкологияда, эндокринологияда, гинекологияда және вирусологияда кеңінен қолданылады.
RIA әдістері
Табиғатына қарай талдаудың бірнеше әдістерін ажырату әдетке айналған.реакциялар:
- Бәсекелес емес әдіс стандартты және анықталатын антигендер, буферлік ерітінді, изотоппен белгіленген антиденелер, сорбентпен байланысатын белгілі бір антиденелер сияқты реакция компоненттерімен сипатталады. Тексерілетін антиденелерге антиген қосылады. Инкубациядан кейін антиген-антидене кешендері пайда болады, сорбент жуылады, таңбаланған антиденелер қосылады, олар кешендегі антигенмен байланысады. Радиоактивтілік тексерілетін антигеннің концентрациясына байланысты.
- Бәсекеге қабілетті радиоиммундық талдау антигендік бәсекеге негізделген. Мұнда реакцияның бақылаушы және анықталған антигендер, буферлік ерітінді, сорбентпен байланысатын белгілі бір антиденелер, сонымен қатар изотоппен белгіленген антиген сияқты компоненттері бар. Диагностика зерттелетін антигенді енгізуден басталады. Сорбентте антиген-антидене кешені түзіледі. Содан кейін сорбент жуылады, ал таңбаланған антиген енгізіледі. Осылайша ол антиденемен байланысады. Есептегіштердің көмегімен реакция мен радиоактивтіліктің мөлшері өлшенеді. Ол үлгідегі антиген мөлшеріне кері пропорционалды болады.
- Жанама әдіс ең көп таралған. Бұл жағдайда реакция компонентінің радиоиммунды талдауында бақылау және сынақ сарысуы, сорбентпен байланысқан антигендер немесе антиденелер, изотоптармен таңбаланған антиденелер, буферлік ерітінділер бар. Диагноз қойылған антиденелер немесе антигендер сорбентпен байланысқан антигендермен немесе антиденелермен әрекеттеседі. Содан кейін инкубация жойылады, таңбаланған антиденелер енгізіледі, олар байланысадыантиген-антидене кешендері.
Талдау әдістемесі
Сонымен, радиоиммунды талдау арнайы реагенттер арқылы жүргізіледі. Жиындар стандартты, сондықтан кез келген қателер мен бұзушылықтарға жол берілмейді. Диагностикалық нәтижелер сенімді. Талдау таңертең жүргізіледі, бұл үшін олар адамнан веноздық қан алады. Зертханада қаннан сарысу бөлінеді, ол РИА үшін қолданылады. Бұл сарысу реагенттермен араласады. Алынған қоспа термостатта берілген температурада инкубацияланады.
Алынған қоспада бос және байланысқан изотоптар бөлінеді. Одан кейін келіп түскен материал зерттеліп, нәтижесі есептеледі. Радиоиммунды талдау механизмінің бірнеше нұсқасы бар. Жоғарыда сипатталған техника сұйық фазалық RIA болып табылады, өйткені барлық компоненттер сұйық күйде. RIA және қатты фаза бар, мұнда антиденелер сұйықтықта ерімейтін тасымалдаушыға орналастырылады.
Диагностиканың қолжетімділігі
Бұл диагностикалық әдісті медицинада қолдану жылдан жылға танымал бола түсуде. Жақында радиоиммундық талдау стандартты диагностикалық әдіске айналды, оны соңғы диагнозды қою кезінде дәрігер тағайындай алады. Ұзақ уақыт бойы талдаудың бұл түрі тек зертханаларда ғана жүргізілсе, бүгінде ол жалпы зерттеу әдісіне айналды. Бірақ РИА қымбат жабдықты (гамма есептегіштер) пайдалануды талап етеді, ал реагенттер жиынтықтарының қызмет ету мерзімі қысқа. Мұның бәрі оны анықтайтын мұндай талдаудың негізгі кемшілігіқымбат баға.
Сонымен қатар, РИА жақында изотоптармен әрекеттесуді қажет етпейтін заманауи зерттеу әдістерін ығыстыра бастады. Оларға иммуноферменттік талдау кіреді. Осылайша, РИА көптеген клиникаларда қажет. Ол үлкен қалалар мен диагностикалық орталықтарда бұрыннан қолданылған, бірақ шағын қалалардағы қарапайым ауруханаларда бұл талдау құны жоғары болғандықтан іс жүзінде қолданылмайды.
RIA абыройы
Радиоиммундық талдаудың көптеген артықшылықтары бар. Бұл өте ерекше және жоғары сезімталдыққа ие, бұл биологиялық белсенді заттардың керемет аз мөлшерде болуын анықтауға мүмкіндік береді. Бұл талдау өте қарапайым түрде жүзеге асырылады, адамға тек веноздық қан тапсыру қажет. Тест нәтижелері 100% дәл және келесі күні дайын. RIA оңай автоматтандырылуы мүмкін. Осылайша, бұл талдау инфекциялық бактериялардың қалдық өнімдері болып табылатын ақуыздарды анықтауға мүмкіндік береді, бұл организмде инфекцияның болуын көрсетеді.
Вирусологиядағы диагностика
Ең перспективалы РИА вирусологияға арналған, себебі ол вирустық қоздырғыштарды жылдам анықтауға мүмкіндік береді. Себебі, соңғы кездері адамдар арасында өлім-жітімге әкеліп соқтыратын түрлі жұқпалы аурулар көбейіп келеді. Бұл әсіресе жоғары емес елдерге қатыстыәлеуметтік-экономикалық даму (Қиыр Шығыс елдері), радиоиммундық талдау мұнда өте қажет. Микробиология бұл диагностикалық әдісті патогендік бактериялар тудыратын жұқпалы ауруларды анықтау үшін де пайдаланады. Мысалы, РИА іш сүзегін анықтау үшін кеңінен қолданылады. Аурудың алғашқы күндерінде емдеуді тағайындау алдында нәжіс пен құсуды зерттеу қажет. Дегенмен, диагностикалық нәтижелер ұзақ уақыттан кейін алынады. Мұнда РИА көмекке келеді, талдау қысқа мерзімде аурудың қоздырғышын анықтауға мүмкіндік береді. Адам қан тапсырады, келесі күні зерттеу нәтижесі дайын. Бұл талдау дәл диагноз қоюға көмектеседі.
Нәтижелер
Радиоиммундық талдау қазіргі уақытта ең сезімтал диагностикалық әдістердің бірі болып табылады. Ол антиденелер алуға болатын кез келген затты талдау үшін қолданылады. Бұл әдіс зерттелетін сұйықтықтың ең аз көлемінде көптеген үлгілерді жасауға, сонымен қатар нәтижелерді барынша қысқа мерзімде жазуға мүмкіндік береді, өйткені оны толығымен автоматтандыруға болады. Бұл талдауды 1950 жылдары Соломон Берсон жасаған. Отыз жылдан кейін ол кең тарады. Бүгінгі күні РИА-ға жүз пайыздық балама жоқ, өйткені талдау жоғары сезімталдыққа ие. RIA медицинаның әртүрлі салаларында, сондай-ақ микробиология мен вирусологияда қолданылады.
Соңында
Вирусологияда әдісті қолдану бүгінгі күні өте өзекті, өйткені ол бередіинфекциялардың таралуын зерттеу, нақты диагноз қою және нақты емдеуді тағайындау мүмкіндігі. Бұл проблема әсіресе экономикасы мен әлеуметтік дамуы төмен елдер үшін өзекті. Сондай-ақ, бұл талдау адам ағзасындағы гормондар мен ферменттердің мөлшерін анықтауға мүмкіндік береді. Сенімді нәтижелерге қол жеткізу үшін зерттеуші тек талдау үшін қан тапсыруы керек. Медицина бір орында тұрмайды, радиоиммундық талдаумен қатар жаңа зерттеу әдістері пайда болды, бірақ РИА медициналық диагностикада көшбасшылардың бірі болып қала береді.
